美國(guó)R&D Systems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面，并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，elisa試劑盒又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。
大家看到此過程中有一個(gè)“固相載體”，那就是酶標(biāo)板。酶標(biāo)板是一種配合在酶標(biāo)儀上，用來做酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)的耗材。
雖然它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板，美國(guó)R&D Systems試劑盒但是在酶免疫測(cè)定中卻是一個(gè)*的部分。所以可以知道，酶標(biāo)板是一個(gè)*的中介，沒有了這個(gè)中介，整個(gè)實(shí)驗(yàn)就無法進(jìn)行操作。換一句話說，只要你用酶標(biāo)儀做酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)，就必然會(huì)用到酶標(biāo)板。或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，因此陽性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。
如抗原為高純度的，可直接包被固相。如抗原中會(huì)有干擾物質(zhì)，直接包被不易成功，可采用捕獲包被法，即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體，然后加入抗原，形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質(zhì)，然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體有多種模式，可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，抗hbelisa試劑盒一般采用此法。另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，洗滌后再加入酶標(biāo)抗體，與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)。抗hbe的檢測(cè)一般采用此法。
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更新時(shí)間：2020-05-27
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