Elisa試劑盒檢測原理

Elisa生物檢測是一種敏感度高，同時特異性強，重復性好的實驗檢測方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學檢驗的各領(lǐng)域中。

目前市面上的Elisa試劑盒檢測原理主要有以下四種：直接法，間接法，夾心法，競爭法。

Elisa試劑盒評價標準：

① 準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，應(yīng)大于等于0.9900。

② 靈敏度：反應(yīng)試劑盒的檢測濃度最小值

③ 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

④ 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)

⑤ 回收率：判斷實驗的準確性和特異性

Elisa試劑盒的標準曲線：

標曲R值是幾個9才合格？

實驗室應(yīng)按檢測標準（方法）的要求使用標準溶液或標準物質(zhì)建立標準曲線。所用標準溶液或標準物質(zhì)應(yīng)覆蓋被測樣品的濃度范圍。檢測標準（方法）如無具體的要求，至少使用5個標樣（除空白外）建立線性標準曲線，每個點重復測定1-3次，對于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98，對于確證方法，相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。

其實，大于0.99是判斷是否為線性相關(guān)的一個標準，實際應(yīng)用中線性大于0.999才是比較理想的。線性在0.99到0.999之間的監(jiān)測結(jié)果只用接近最高濃度一半（中間濃度）的位置才比較準確，如果線性大于0.999的話，在整個線性范圍內(nèi)都會有一個比較滿意的結(jié)果。

如果檢測的線性不好，可以減少標準的覆蓋范圍，將標準的濃度調(diào)整到待測樣品濃度附近，這樣結(jié)果也是非常準確的。例如，樣品的濃度約20ppb,但在0~50ppb范圍建立標準曲線，但線性非常不理想，這時可以將標準范圍調(diào)整到15~25ppb之間，作五個標準。

可以檢測檢測各類食品，飼料，組織及生物液體中真菌毒素、抗生素、食品添加劑以及其他細菌蛋白的ELISA試劑盒：

1.抗生素類：氨芐青霉素，貨號：E4350，樣本：血清，尿液，牛奶，組織

檢測食品中抗生素的殘留

樣本類型：組織、血清、牛奶、雞蛋和其他生物樣本

真菌毒素是真菌產(chǎn)生的低分子量次級代謝產(chǎn)物

2.真菌毒素：總黃曲霉毒素，貨號：E4747，樣本：酒、醬油、醋、谷物、花生、配方飼料、食用油

樣品類型：玉米、谷物、花生、大米、大豆等。

食品受到生物和環(huán)境污染物的污染發(fā)生在生產(chǎn)和加工的幾個階段

3.食品添加劑： 沙丁胺醇，貨號：K4209，樣本：豬尿、組織、飼料

樣品類型：牛奶、肉類、玉米、谷物、花生、大米、大豆，等。

表達蛋白經(jīng)過幾個純化步驟后，宿主細胞蛋白仍然可以以較高濃度存在，甚至會與原料藥一起純化和濃縮；樣品類型：細胞裂解液、其他生物液

4.宿主細胞蛋白：CHO 宿主細胞蛋白，貨號：E4537，樣本：細胞裂解液，其他生物液體

5.其他毒素：雙酚A（BPA），E4722，樣本：細胞裂解液，其他生物液體