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      當前位置:首頁技術文章抗體的“存“和“取“

      抗體的“存“和“取“

      更新時間:2022-05-16點擊次數(shù):2689

      一、抗體的簡介
      抗體是一些淋巴細胞直接抵抗外來分子所產(chǎn)生的蛋白質,它們是免疫系統(tǒng)的重要組成成分,是實驗室的重要工具??贵w有兩個成員:多克隆抗體和單克隆抗體。多克隆抗體是用抗原注射動物產(chǎn)生的,針對相同蛋白質的不同抗原決定簇直接產(chǎn)生的各種不同親和性的多種免疫球蛋白的混合物。單克隆抗體是在體外制備的,是免疫淋巴瘤細胞與分泌抗體的漿細胞融合后產(chǎn)生的,整個培養(yǎng)只產(chǎn)生一種抗體(常是IgG) ,直接抵抗外來物。
      二、抗體的作用

      抗體可以用放射性元素或者酶來標記,可以讓它們所識別的蛋白質變成可見的或者是可以定量的。
      1)染色細胞:標記抗體可以用來定位細胞蛋白質。
      2)免疫沉淀:抗體可以用來檢測抗原是否存在以及其功能。

      表一  免疫化學技術、多克隆抗體和單克隆抗體

      技術

      多克隆抗體

      單克隆抗體

      共聚單克隆抗體

      細胞染色
      免疫共沉淀
      免疫印跡
      免疫親和純化

      一般好
      一般好
      一般好

      抗體依賴
      抗體依賴
      抗體依賴
      抗體依賴

      很好
      很好
      很好

      免疫方法




      標記抗體
      標記抗原

      困難
      一般好


      抗體依賴

      很好
      很好

      3)免疫印跡:就是我們所知道的免疫印跡法,蛋白質是否存在以及數(shù)量都可以在濾膜上通過樣品的免疫來檢測出。
      4)免疫親和:抗體所針對的蛋白質可以直接被分離和純化。
      三、抗體的貯藏

      1)抗體最好貯藏在-20℃分裝,凍融對于大多數(shù)抗體都不好。

      2)分裝好的抗體可以在4℃保存至少6個月。

      3)加上疊氮鈉至終濃度0.02%來阻止細菌的生長。

      四、注意事項

      1)要知道你的抗體是由什么動物產(chǎn)生的,方便后續(xù)決定用什么樣的二抗。多克隆抗體通常用兔或者猴子,單克隆抗體通常用小鼠、大鼠和倉鼠。
      2)使用前離心去除所有的沉淀,在一些操作中可以阻止高背景。
      3)A蛋白,從S. aureus 細胞壁中分離到的42 kDa的多肽;G 蛋白,從β溶血鏈球菌中分離到的30-35 kDa 的多肽,都與抗體有強烈的結合,它們被用來免疫沉淀或者定位抗體。A蛋自和G蛋白都可以用來與珠子結合或者標記,適用于大部分的抗體亞類。

       


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