以下便是PEI轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染步驟所在

　　PEI轉(zhuǎn)染試劑是以一種陽(yáng)離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine，PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負(fù)電的DNA牢固結(jié)合，并賦予凈陽(yáng)離子電荷，使DNA進(jìn)入細(xì)胞。PEIPrime是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑，利用PEI的特性旨在實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)量，可重復(fù)性和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)。

　　PEI轉(zhuǎn)染試劑能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞系，包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。此外，PEI是用于HEK293和CHO懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑。PEI轉(zhuǎn)染試劑是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的合適選擇，包括重組蛋白，抗體和病毒。它能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞系，包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞，具有較高的轉(zhuǎn)染效率，尤其對(duì)于懸浮細(xì)胞（如293-F、CHO-S等）表現(xiàn)出的性能，同時(shí)也具有低毒、高效、操作簡(jiǎn)單等特性，也可用于Invivo動(dòng)物體內(nèi)的高效轉(zhuǎn)染。

　　PEI因其高效和低毒的性能，可廣泛用于哺乳動(dòng)物的蛋白表達(dá)。實(shí)驗(yàn)表明，轉(zhuǎn)染的細(xì)胞蛋白表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他轉(zhuǎn)染試劑，適合重組蛋白的大規(guī)模生產(chǎn)。

　　PEI轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染步驟：

　　-以HEK293貼壁細(xì)胞為例，步驟如下：

　　1、細(xì)胞接種：細(xì)胞密度2-6x106cells/mL。

　　2、質(zhì)粒的準(zhǔn)備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中，每106個(gè)細(xì)胞稀釋1.0ugpDNA。

　　3、PEI的準(zhǔn)備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中，每106個(gè)細(xì)胞稀釋3.0ugPEIPrime，混勻。

　　4、通過(guò)快速，短暫渦旋或顛倒數(shù)次試管，將pDNA和PEIPrime溶液混合在一起。

　　5、使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。

　　6、一邊旋轉(zhuǎn)板，一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細(xì)胞中。

　　7、于37℃CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。