親和層析填料介紹

親和色譜（Affinity chromatography，又稱(chēng)為親和層析）是一種利用固定相的結(jié)合特性來(lái)分離分子的色譜方法。親和色譜在凝膠過(guò)濾色譜柱上連接與待分離的物質(zhì)有一定結(jié)合能力的分子，并且這種結(jié)合是可逆的，在改變流動(dòng)相條件時(shí)二者還能相互分離。親和色譜可以用來(lái)從混合物中純化或濃縮某一分子，也可以用來(lái)去除或減少混合物中某一分子的含量。

親和色譜具有高選擇性，而且能有效地保持生物大分子高級(jí)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，同時(shí)還具有對(duì)活性樣品高回收率的特點(diǎn)，所以親和色譜可以用來(lái)從細(xì)胞提取物中分離純化核酸、蛋白質(zhì)，還可以從血漿中分離抗體。分離重組蛋白就經(jīng)常使用親和色譜。

BioToolomics開(kāi)發(fā)了多種親和層析填料，比如谷胱GAN肽親和層析填料、蛋白A親和層析填料、蛋白G親和層析填料、鈷親和層析填料、鎳親和層析填料和肝素親和層析填料等。

谷胱GAN肽親和層析填料（Glutathione SepFast）是一種用于快速純化谷胱GAN肽s -轉(zhuǎn)移酶(GST)標(biāo)記蛋白的親和層析填料，可以快速純化細(xì)菌、酵母、昆蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物中表達(dá)的GST標(biāo)記蛋白。

蛋白A親和層析填料和蛋白G親和層析填料是一種用于純化免疫球蛋白的親和層析介質(zhì)，可以用于從生物體液和細(xì)胞培養(yǎng)基中分離和純化免疫球蛋白的類(lèi)別、亞類(lèi)和片段：

·Protein A SepFast Large Bead和Protein G SepFast Large Bead，粒徑：150 - 350µm，特別適合處理粘性或含細(xì)胞的原料(即高沉降率和極低的柱壓)；

·Protein A SepFast HighRes和Protein G SepFast HighRes，粒徑：20 – 50 µm，適合小柱運(yùn)行，停留時(shí)間短(即較高的流速)；

·Protein A SepFast和Protein G SepFast，粒徑：50 – 150 µm，適用于大多數(shù)從小規(guī)模到大規(guī)模的純化需求(即低柱壓)；

固定化金屬親和色譜 (IMAC) 基于某些過(guò)渡金屬離子（主要是Ni²⁺、Zn²⁺和Co²⁺）與含有組AN酸（或半胱AN酸和色AN酸）的暴露氨基酸表面鏈之間的特定相互作用。IMAC用于純化在細(xì)菌、酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的帶組AN酸標(biāo)簽的重組蛋白，還可用于純化某些天然的非標(biāo)記蛋白質(zhì)，例如干擾素、凝集素、抗體、血清和血漿蛋白、肽和肽激素。IMAC SepFast或其三種帶金屬電荷的形式（Ni SepFast、Co SepFast和Zn SepFast），具有高度穩(wěn)定性并與蛋白質(zhì)純化過(guò)程中常用的多種化學(xué)品（例如去垢劑、變性試劑和還原劑等）兼容。

肝素親和層析填料（Heparin SepFast）用于純化對(duì)肝素有親和力的生物分子，如抗凝XUE酶III、凝XUE因子和其他血漿蛋白、DNA 結(jié)合蛋白、脂蛋白、蛋白質(zhì)合成因子、作用于核酸的酶和類(lèi)固醇受體等。

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