流式細(xì)胞術(shù)在科研方面有哪些應(yīng)用？

流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種對處在快速流動中的細(xì)胞或其它生物微粒逐個(gè)進(jìn)行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù)。它集計(jì)算機(jī)技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、熒光標(biāo)記技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體，按照細(xì)胞或生物顆粒的物理或化學(xué)性質(zhì)，同時(shí)具有分析和分選細(xì)胞或生物顆粒的功能。

流式細(xì)胞術(shù)在科研方面有哪些應(yīng)用？讓我們一起來看看吧！

一、細(xì)胞凋亡檢測

在正常細(xì)胞中，細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）位于胞漿側(cè)。細(xì)胞凋亡中期，PS 外翻。Annexin V 是一種 Ca2+ 依賴的對 PS 具有高度親和力的磷脂結(jié)合蛋白，因此可以用熒光標(biāo)記的 Annexin V 檢測 PS 的外翻。凋亡末期，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受損，原本不透膜的核酸染料（如 PI、7-AAD 等）也能進(jìn)入細(xì)胞，從而產(chǎn)生信號。分別檢測 Annexin V 和不透膜核酸染料的信號，可對凋亡中期和末期細(xì)胞的比例進(jìn)行定量。

二、細(xì)胞周期檢測

細(xì)胞核 DNA 含量隨著細(xì)胞增殖周期時(shí)相的不同而發(fā)生變化，用 DNA 染料進(jìn)行染色，DNA 含量多，熒光信號強(qiáng)，DNA 含量少，熒光強(qiáng)度低。通過對細(xì)胞瞬間的快速測定，判斷細(xì)胞所處的細(xì)胞周期時(shí)相，并分析群體細(xì)胞中處于不同周期時(shí)相的細(xì)胞比例，以研究細(xì)胞的周期，DNA 復(fù)制和染色體倍性等。在腫瘤學(xué)研究中尤其常用，可以此來判斷藥物對腫瘤細(xì)胞影響、腫瘤的生長速度與患者預(yù)后等。

三、Th/Treg檢測

通過刺激阻斷劑對 T 細(xì)胞進(jìn)行處理，通過檢測表面或胞內(nèi)標(biāo)志物進(jìn)行分型檢測。

四、免疫分型檢測

利用細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)特異性抗體分子，分別選用不同標(biāo)記的流式抗體對細(xì)胞進(jìn)行分型和分析。