Elabscience Caspase 2活性檢測(cè)試劑盒樣本如何處理？

Elabscience Caspase 2活性檢測(cè)試劑盒采用分光光度法，可用于檢測(cè)細(xì)胞、組織裂解液或其它樣本的 caspase 2 活性。那么你知道Elabscience Caspase 2活性檢測(cè)試劑盒樣本該如何處理嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

1. 細(xì)胞樣本

按照常規(guī)方法收集細(xì)胞沉淀，PBS 重懸細(xì)胞并計(jì)數(shù)，600×g 離心 5 min，棄上清，按照每 100 萬(wàn)細(xì)胞加入 100 μL Cell Lysis Buffer 的比例加入預(yù)冷的 Cell Lysis Buffer 重懸細(xì)胞， 在冰浴條件下裂解 30 min，裂解期間需渦旋震蕩 3~4 次，每 次 10 s。裂解后的樣本，于 4°C，11000 ×g 離心 10~15 min， 小心地吸取上清至新的 EP 管中，并置于冰上待用。同時(shí)使 用 Bradford 法（E-BC-K168-M）測(cè)定蛋白濃度。 注：檢測(cè)貼壁細(xì)胞時(shí)，需收集誘導(dǎo)后產(chǎn)生的懸浮細(xì)胞，并與 后續(xù)收集的貼壁細(xì)胞一起檢測(cè)。

2. 組織樣本

取 50 mg 待測(cè)組織樣本，用 PBS 或者生理鹽水清洗 1-2 次， 去除組織中殘留的血細(xì)胞，用手術(shù)剪剪碎，加入 200 μL 預(yù)冷 的 Cell Lysis Buffer，進(jìn)行勻漿（在冰浴條件下進(jìn)行，若組織 質(zhì)量加倍時(shí)，加入的預(yù)冷 Cell Lysis Buffer 也需加倍）。將勻 漿好的樣本轉(zhuǎn)移至 1.5 mL 離心管中，冰浴裂解 30 min。裂解 后的樣本，于 4°C，11000×g 離心 10~15 min，小心地吸取上 清至新的 EP 管中，并置于冰上待用。同時(shí)使用 Bradford 法 （E-BC-K168-M）測(cè)定蛋白濃度。 注：制備好的樣本應(yīng)立即測(cè)定，若無(wú)法及時(shí)測(cè)定，可將裂解 后的上清保存在-80°C，2 周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

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