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      當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑介紹

      Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑介紹

      更新時(shí)間:2025-06-19點(diǎn)擊次數(shù):1229

      標(biāo)題: Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑介紹

      在生命科學(xué)研究,特別是基因功能研究、蛋白表達(dá)和基因治療等領(lǐng)域,將外源核酸(DNARNA)高效、安全地導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)部是至關(guān)重要的實(shí)驗(yàn)步驟,這一過程稱為轉(zhuǎn)染Polysciences公司作為國際z名的生命科學(xué)試劑與材料供應(yīng)商,憑借其深厚的技術(shù)積累,開發(fā)了一系列性能z越的轉(zhuǎn)染試劑,為全球科研工作者提供了高效、可靠的工具。以下是關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的深度解析

      一、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑核心優(yōu)勢(shì)  

      1. 廣譜高效性  

         - 細(xì)胞兼容性極廣:成功驗(yàn)證于HEK293CHOHeLa等常見細(xì)胞系,及原代細(xì)胞、干細(xì)胞、懸浮細(xì)胞(如Jurkat)等難轉(zhuǎn)染類型。  

         - 多核酸適配:適用于質(zhì)粒DNAsiRNAmRNACRISPR-Cas9組件,尤其擅長(zhǎng)大質(zhì)粒(>10kb) 轉(zhuǎn)染。  

      2. 成本效益比突出  

         - 價(jià)格僅為商品化試劑(如jetPEI®)的1/5-1/31g裝售價(jià)約$100,可配制500mL以上工作液,單次轉(zhuǎn)染成本低至$0.1。  

      3. 定制化靈活性  

         - 提供線性PEI25 kDa) 與 支鏈PEI25/40/60 kDa) 多分子量選擇:  

           - 25 kDa線性PEI:毒性低,適合原代細(xì)胞  

           - 40 kDa支鏈PEI:轉(zhuǎn)染效率高,適用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系  

      二、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑性能實(shí)測(cè)對(duì)比  

      指標(biāo)

      Polysciences PEI

      進(jìn)口競(jìng)品(如jetPEI®

      HEK293效率

      85-95%

      90-98%

      CHO細(xì)胞存活率

      80%

      85%

      懸浮細(xì)胞效率

      60-75% (Jurkat)

      65-80%

      批間穩(wěn)定性

      需自行質(zhì)檢

      預(yù)質(zhì)檢認(rèn)證

      三、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑操作關(guān)鍵點(diǎn)  

      1. 工作液配制  

         - PEI粉末溶解于無菌pH 4.5鹽酸溶液,煮沸10分鐘,調(diào)pH7.0后過濾除菌(避免直接使用PBS導(dǎo)致沉淀)。  

      2. 轉(zhuǎn)染復(fù)合物比例  

         - 黃金比例范圍:  

           - DNA : PEI = 1μg : 2-4μg(貼壁細(xì)胞)  

           - DNA : PEI = 1μg : 3-6μg(懸浮/難轉(zhuǎn)細(xì)胞)  

         - 孵育時(shí)間:15-30分鐘(室溫)  

      3. 毒性控制技巧  

         - 轉(zhuǎn)染后6小時(shí)更換培養(yǎng)基,降低長(zhǎng)期毒性  

         - 難轉(zhuǎn)染細(xì)胞添加0.1mM丁酸鈉提升表達(dá)  

      四、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑適用場(chǎng)景推薦  

      - 強(qiáng)烈推薦:  

        - 大規(guī)模生產(chǎn)(病毒包裝、蛋白表達(dá))  

        - 經(jīng)費(fèi)有限的實(shí)驗(yàn)室高頻次轉(zhuǎn)染  

        - 大片段DNA(>15kb)遞送  

      - 謹(jǐn)慎使用:  

        - 對(duì)細(xì)胞毒性極度敏感的神經(jīng)元  

        - 無血清培養(yǎng)體系(需優(yōu)化復(fù)合物緩沖液)  

      五、 Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑缺陷與應(yīng)對(duì)  

      1. 批次差異風(fēng)險(xiǎn)  

         - 每批PEI需用報(bào)告基因質(zhì)粒(如pEGFP) 預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳比例。  

      2. 沉淀問題  

         - 復(fù)合物出現(xiàn)絮狀沉淀時(shí),加入5-10%葡萄糖改善分散性。  

      3. 支原體污染  

         - 購買后立即分裝凍存,使用前過濾(0.22μm)。  

      > 結(jié)論:Polysciences PEI是預(yù)算敏感型實(shí)驗(yàn)室的s選。其廣譜性、高載量能力和極低單價(jià)優(yōu)勢(shì)顯著,但需付出優(yōu)化成本。掌握配制與比例控制要點(diǎn)后,可穩(wěn)定獲得媲美進(jìn)口試劑的效果,特別推薦用于病毒生產(chǎn)和大規(guī)模轉(zhuǎn)染項(xiàng)目。  

       

      注:建議s選貨號(hào)24765-1(線性PEI 25kDa),適用性廣,毒性可控。

       

       

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