什么是原代細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞生長(zhǎng)曲線？

你知道什么是原代細(xì)胞培養(yǎng)，和細(xì)胞生長(zhǎng)曲線嗎？，讓我們一起來(lái)看看吧！一、原代細(xì)胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的shou次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時(shí)間短，遺傳性狀和體內(nèi)細(xì)胞相似，適于做細(xì)胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。常用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。一、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線細(xì)胞生長(zhǎng)曲線是測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)...

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如何選擇熒光定量PCR中的對(duì)照？

對(duì)照的目的是對(duì)檢測(cè)的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)控，因此我們按照檢測(cè)的流程對(duì)對(duì)照進(jìn)行梳理。那么我們應(yīng)該如何選擇熒光定量PCR中的對(duì)照呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照是指在相同的處理?xiàng)l件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進(jìn)行了提取和擴(kuò)增最終獲得了陽(yáng)性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽(yáng)性對(duì)照強(qiáng)調(diào)處理過(guò)程與樣品一致，并且有明確的預(yù)期結(jié)果。二、擴(kuò)增對(duì)照我們通常說(shuō)的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照指的是擴(kuò)增試劑盒中附帶的不需要提取的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，更準(zhǔn)確的定義應(yīng)該是擴(kuò)增陽(yáng)性...

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你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？

熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，通過(guò)對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)產(chǎn)物熒光信號(hào)的實(shí)時(shí)檢測(cè),最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、分子生物學(xué)研究1.核酸定量分析：對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測(cè),比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物基因拷貝數(shù)的檢測(cè)，RNAi基因失活率的檢測(cè)等。2.基因表達(dá)差異分析：比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差...

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你知道細(xì)胞凍存的原理和實(shí)驗(yàn)步驟嗎？

細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。那么你知道細(xì)胞凍存的原理和實(shí)驗(yàn)步驟嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！原理：將細(xì)胞放在-196℃液氮中，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)，減少細(xì)胞代謝，理論上儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。最佳的冷凍條件是盡可能地降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷。上述要求可通過(guò)下列方法獲得：1.緩慢冷凍，使細(xì)胞內(nèi)水分離開(kāi)細(xì)胞，但不可太慢，以避免冰晶形成；2.用親水的低溫保護(hù)劑排除水分；3.在盡可能低的溫度下保存細(xì)胞，降低高濃度鹽對(duì)冰中蛋白質(zhì)變性的...

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細(xì)胞凍存有何注意事項(xiàng)？

細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。原理是將細(xì)胞放在-196℃液氮中，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)，減少細(xì)胞代謝，理論上儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。那么細(xì)胞凍存有何注意事項(xiàng)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、DMS0稀釋時(shí)會(huì)釋放大量熱量，不能直接加到細(xì)胞液中，須事先配制，且DMSO必須是細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的；二、緩慢冷凍，細(xì)胞逐步脫水，不會(huì)因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害；三、選擇細(xì)胞生長(zhǎng)良好、密度約為80-90%、活力達(dá)90%以上的細(xì)胞凍存；四、凍存時(shí)細(xì)胞密度少于5X105個(gè)活細(xì)胞/mL時(shí)，很難成功復(fù)蘇；五、...

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