細(xì)胞污染問題分析與解決

細(xì)胞污染問題分析解決細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí)，細(xì)胞狀態(tài)的好壞對轉(zhuǎn)染效率有很大影響。細(xì)胞污染可能會導(dǎo)致細(xì)胞死亡，本文主要總結(jié)了細(xì)胞培養(yǎng)中常見污染現(xiàn)象和解決方法。凡是對細(xì)胞生長有危害的成分或者造成細(xì)胞不純的異物都視為污染。細(xì)胞污染根據(jù)污染源可以分為化學(xué)污染，物理污染和生物污染。本文主要描述微生物污染的現(xiàn)象及解決方法微生物污染1.細(xì)菌：細(xì)菌污染常見的有大腸桿菌，葡萄球菌等。細(xì)菌污染較易發(fā)現(xiàn)，在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，培養(yǎng)液一般會在短時(shí)間內(nèi)變黃，有時(shí)靜置的培養(yǎng)液不混，稍加震蕩，變會有很多混濁...

查看更多

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的建立

本文主要介紹穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的原理、步驟，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠得到穩(wěn)定高表達(dá)的細(xì)胞株，是滿足活性蛋白大量制備的方法。利用哺乳動物系統(tǒng)生產(chǎn)蛋白的方式有兩種：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。使用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)蛋白，細(xì)胞的選擇培養(yǎng)也不可忽視。常用的有中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO）和人胚腎細(xì)胞（HEK293）。德泰生物主要培養(yǎng)HEK293用于哺乳動物細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，CHO細(xì)胞用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染通過穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建篩選出能夠穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株。針對瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，外源基因在短時(shí)間轉(zhuǎn)錄翻譯得到的蛋白量少，1mg質(zhì)粒得到1mg...

查看更多

細(xì)胞轉(zhuǎn)染：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染效率影響因素

真核蛋白表達(dá)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方式有兩種：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，本文的主要介紹了兩者的定義和適用性及細(xì)胞轉(zhuǎn)染一般步驟，影響轉(zhuǎn)染效率的因素，幫助我們提高實(shí)驗(yàn)的成功率。在哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn)，根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模瑢①|(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞有兩種方法：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的過程。質(zhì)粒、DNA、RNA將這些外源基因?qū)氲秸婧思?xì)胞內(nèi)并不容易，要跨越細(xì)胞膜的屏障進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指外源基因?qū)氲郊?xì)胞后得以表達(dá)，但是基因不整合到細(xì)胞的基因組上，因此不會隨著細(xì)胞的生長...

查看更多

我們?yōu)槭裁匆X？

人的一生中約有三分之一的時(shí)間都在睡覺，睡眠是整個(gè)動物界生存所必須的過程。有研究表明，動物在醒著的時(shí)候會受到一定程度的神經(jīng)系統(tǒng)損害，由此產(chǎn)生的受損基因和蛋白質(zhì)，會在腦部堆積并引起疾病，而睡眠有助于修復(fù)這種損害并清除這些垃圾。也有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，睡眠可以促進(jìn)與學(xué)習(xí)和記憶鞏固相關(guān)的神經(jīng)塑性重組及突觸的生長。但我們目前對于神經(jīng)修復(fù)和重組在睡眠期間的相對作用，以及其在個(gè)體發(fā)育過程中是否會發(fā)生變化仍不清楚。近日，來自英國帝國理工大學(xué)、美國加利福尼亞大學(xué)以及德克薩斯大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)在《Scienc...

查看更多

你可知美國R&D Systems試劑盒性能的重要性！

美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面，并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，美國R&DSystems試劑盒盒又保留酶的活性。在測定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。美國R&DSystems試劑盒性能的重要性:①靈敏度：反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢...

查看更多