蛋白質提純的注意事項和常見問題有什么？

在進行任何一種蛋白質純化的時候，都要時刻注意維護它的穩定性，保護它的活性，那么你知道蛋白質提純的注意事項和常見問題有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、注意事項：1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫內進行。2、濃度不要太稀，蛋白濃度維持在μg/mL～mg/mL。3、選擇合適的pH，除非是進行聚焦層析，所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同，防止蛋白質的沉淀。4、使用蛋白酶抑制劑，防止蛋白酶對目標蛋白的降解；在純化細胞中的蛋白質時，加入DNA酶，降解DNA，防止DNA對蛋白的污染。5、避免...

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你知道WB實驗操作步驟有哪幾步嗎？

蛋白質印跡(Westernblotting)：又稱為免疫印跡，根據抗原抗體的特異性結合，半定量檢測樣品中的某種蛋白的方法。基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析條帶的位置和條帶深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況。那么你知道WB實驗操作步驟有哪幾步嗎？讓我們一起來看看吧！一、樣本制備蛋白提取1.前期準備：首先要了解你所研究蛋白的內源表達水平，常用的數據庫如Uniport、Atlas、BioGPS，或查閱相關文獻。設置陽性對照...

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細胞培養基的滅菌及儲存方法有哪些？

不同的培養基由于其營養成份不同，滅菌方式和儲存方法也可能不同。那么細胞培養基的滅菌及儲存方法有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、不同細胞培養基的除菌方式及注意事項某些培養基（如MEM）可進行高壓滅菌，這類培養基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉，一般是在培養基高壓滅菌后才加入。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）代替L-谷氨酰胺。可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi，15分鐘的條件下wan全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失，不需將滅菌時間延長。絕大多數細胞...

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細胞培養基的理化性質有什么？

動物細胞在細胞培養基中不僅能存活，還要分裂增殖，合適的滲透壓、pH值等理化性質是細胞培養基必須具備的前提條件。那么細胞培養基的理化性質有什么呢？讓我們一起來看看吧！一、pH動物細胞大多數需要輕微的堿性條件，適宜pH在7.2～7.4之間。細胞培養基的pH值通常需經校正的pH計來測定。在細胞生長過程中，隨細胞數量的增多和代謝活動的加強，二氧化碳不斷被釋放，培養液變酸，pH值發生變化。酚紅是細胞培養基中常用的pH指示劑，但依靠細胞培養基中的酚紅等pH指示劑進行判斷，需要實驗員的經驗...

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細胞的處理與采集方法是什么？

采集方法和處理是獲取細胞來源后的關鍵步驟，它們直接影響到細胞的質量和活力。那么你知道細胞的處理與采集方法是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、采集方法：1.骨髓穿刺：通過骨髓穿刺針將針頭插入骨髓腔，通常在骨盆骨骼或胸骨等部位進行。這種方法適用于骨髓來源的細胞，如造血干細胞。2.外周血采集：通過外周靜脈或動脈采集患者的整個血液。這種方法適用于外周血來源的細胞，如外周血造血干細胞。3.脂肪抽取：通過脂肪組織的吸取來獲取脂肪來源的細胞，如脂肪干細胞。這種方法通常使用吸脂器來抽取脂肪組織...

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